双向琼脂扩散法(double immuno-diffusion) 是可溶性抗原和抗体在含有电解质的同一个E琼脂凝胶板的对应孔中，各自向四周凝胶中扩散，如果抗原、抗体两者相对应，则发生特异性反应，在浓度比例合适处形成肉眼可见的白色沉淀线。沉淀线的特征与扩散速度、抗原抗体浓度、纯度等有关。
凝胶扩散免疫沉淀反应以半固体琼脂凝胶作为介质，抗原抗体在凝胶中扩散，形成浓度梯度，在两者比例最适合的位置上，形成沉淀线或沉淀环，包括单向琼脂扩散试验(single agar diffusion) 和双向琼脂扩散试验(double agar diffusion) 等。